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脂多糖(來源于大腸桿菌)使用方法

發(fā)布時間: 2022-05-25  點擊次數: 2588次

脂多糖(來源于大腸桿菌)使用方法


簡介:脂多糖,英文名稱Lipopolysaccharides,簡稱LPS,是革蘭氏陰性細菌細胞壁中的一種*成分,位于細胞壁的外層并暴露于非莢膜細菌的細胞表面,有利于維持細胞外膜的完整性,保護細菌免受膽汁鹽和脂類抗生素的破壞。結構上,脂多糖由類脂A、核心多糖和O-多糖側鏈組成。其中類脂質A是構成細菌內毒素的主要成分,決定其毒性強弱;而O-多糖側鏈在不同細菌間是高度變化的,特異性決定細菌的血清型。 


LPS可以引起免疫刺激的級聯反應和機體的毒性病理生理活動,包括釋放內毒素引起感染性休克從而導致末梢血管虛脫。常通過檢測LPS的存在來診斷腦膜炎。正是LPS與機體免疫機能的密切關系,生命科學研究常常提取LPS進行相關的研究,如闡明LPS的結構,代謝,免疫學,生理學,毒性,生物合成途徑;誘導生長促進因子如白介素的合成與分泌;誘導疾病研究的動物模型如炎癥反應,急性肺損傷。將LPS分別與FITC、TRITC或2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid (TNBSA)反應即可得到FITC、TRITC或TNP標記的LPS,主要用于非胸腺依賴性B細胞對細菌LPS的免疫應答研究。


使用方法

1.配制儲存液(用于細胞培養(yǎng)相關實驗):將1mg LPS重懸于1mL無菌平衡鹽溶液或細胞培養(yǎng)基,輕微旋渦振蕩直至粉末*溶解,即得到1mg/ml的儲存液。此儲存液可進一步用無菌平衡鹽或細胞培養(yǎng)基稀釋至需要的工作濃度。

2.儲存液的保存:本儲存液(1mg/ml)可放在4℃保存,約一個月穩(wěn)定;也可分裝成單次用量后放到-20℃,2年穩(wěn)定。避免反復凍融。

配制注意:LPS溶液應儲存于硅烷化容器內,因為LPS可吸附于塑料或某些玻璃器皿,尤其當其濃度<0.1mg/ml時。但當LPS濃度大于1mg/ml時,上述吸附則可忽略不計。如使用玻璃器皿,則需旋渦振蕩LPS溶液至少30min,以重溶被吸附溶質。

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